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分享一下玉米赤霉烯酮免疫亲和柱使用原理和注意事项

发布时间: 2022-12-20  点击次数: 259次
  玉米赤霉烯酮免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的玉米赤霉烯酮,从而对样品起到非常针对性的净化作用,过柱净化后的样品液可直接用于分析或氮吹复溶后用分析。亲和柱与HPLC/LC-MS配合使用可达到快速测定的目的,以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。
  玉米赤霉烯酮免疫亲和柱使用原理:
  测定的基础是抗原、抗体反应,抗体连接在柱体内,样品经过提取、过滤后,缓慢的通过玉米赤霉烯酮免疫亲和柱,在免疫亲和柱内毒素与抗体结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。用甲醇洗脱玉米赤霉烯酮,然后注入到分析仪器中用于检测。
  注意事项:
  1、上柱的样品溶液应该保持酸碱中性、无悬浮物、甲醇浓度不宜过高;
  2、样品为复杂样品时,可将提取液分两次提取样品,提高提取效果;
  3、样品过柱及甲醇洗脱速度要慢且均匀,约每秒1-2滴;
  4、亲和柱不要在无水状态下,琼脂容易干燥,影响亲和柱的质量;
  5、洗脱一般选择试剂甲醇,为增强洗脱效果可加大甲醇体积;
  6、亲和柱储存条件为四到八度。切记不要存放在零度以下的低温,因为缓冲液冻结,会严重影响亲和柱内的物理结构,对亲和柱的质量影响很大;
  7、样液免疫亲和柱净化后,洗脱液过小孔径滤膜效果更好。
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