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食用油中黄曲霉毒素B1检测方案

发布时间: 2019-03-28  点击次数: 355次

黄曲霉毒素已成为一个困扰食品业界的广泛问题。民以食为天,食品安全是关系到千家万户,关系到食品企业存亡的关键,食用油中黄曲霉毒素B1含量超标,源自花生原料霉变,可能是花生在种植、运输及储存过程中因天气湿热发霉,造成黄曲霉、寄生曲霉等生长繁殖。黄曲霉毒素是一种致癌物质,其毒性是KCN的10倍,As2O3的68倍。黄曲霉毒素的毒性要在加工温度超过280℃时才可以破坏,一般的烹饪方法没办法去除掉,唯有在源头杜绝黄曲霉毒素的污染才是解决之道。

对黄曲霉毒素B1的*,在之前的相关食品卫生标准中有明确规定,其中:玉米、花生仁、花生油中不得超过20ug/kg;大米和其他食用油类不得超过10ug/kg;其他粮食、豆类、发酵食品不得超过5ug/kg;婴儿代乳食品不得检出黄曲霉毒素B1。作为国内专业从事霉菌毒素检测技术与产品服务的供应商, 2010年泰乐祺科技投资成立了"检测应用实验室",重点关注食品安全事件尤其是涉及霉菌毒素安全等问题,以期快速提出解决方案。

泰乐祺科技现针对近期出现的食用植物油中黄曲霉毒素超标问题,提出以下解决方案。

免疫亲和柱+KRC光化学柱后衍生法

1. 简介

Pribofast黄曲霉毒素总量免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的毒素,从而对毒素样品起到非常针对性的纯化作用,然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系统可以有效的测定黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2浓度,提高检测的准确性和灵敏度。

2. 免疫亲和柱/KRC衍生法特点:

PriboFast 黄曲霉毒素总量(B+G)免疫亲和柱

 

· 特异性很强使得样品净化效果;

· 使用免疫亲和柱操作架可以使样品净化快速,提高检测效率高
l  · HPLC+FLD+KRC柱后衍生化,有效提高检测灵敏度,实现较低的检测限 (黄曲霉毒素B1 0.05ppb)。
l  · 衍生化操作方便,光化学衍生化无需使用衍生试剂(通常电化学柱后衍生均需要使用衍生试剂,分析成本高,操作麻烦,仪器故障率较高)。

· 回收率高,达到90%以上。

 

3. 免疫亲和柱法操作步骤简介:

1) 样品处理(植物油脂

· 准确称取试样25.0 g 于250mL具塞锥形瓶中

· 加人5g 氯化钠及加入甲醇/水,以均质器高速搅拌提取2min;

· 定量滤纸过滤,并准确移取15 M l滤液并加入30mL水稀释混匀;

· 用玻璃纤维滤纸过滤1-2次,至滤液澄清,备用。

2)将回温的免疫亲和柱安装在泵流操作架进行过柱净化:经过Pribofast黄曲霉毒素B1免疫亲和柱(IAC-011-3)活化、淋洗、洗脱三步骤,洗脱下来的溶液可直接用于HPLC检测;

3)测定:HPLC直接进样,经黄曲霉毒素色谱柱、KRC光化学柱后衍生化后荧光检测器直接记录黄曲霉毒素B1浓度;

 

Pribofast KRC 柱后衍生器和 HPLC参数(符合GB23212-2008)

 

Pribofast KRC-25 柱后光化学衍生器     波长:254 nm
HPLC-色谱柱 :黄曲霉毒素色谱柱150 x 4.6 mm; C-18
流动相: 甲醇/水  (45/ 55  v/v)
流量:1.0 mL/min                 柱温: 30 °C
进样体积:  20μL
荧光检测器: λ-激发波长: 365 nm        λ-发射波长: 440 nm

液相色谱仪检测配置

液相色谱仪带有荧光检测器

Pribofast KRC-25 柱后光化学衍生装置,含有1ml反应池,纳米灯管254nm

黄曲霉毒素色谱柱 C18 150 x 4.6 mm

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