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黄曲霉毒素分析方法汇总

发布时间: 2019-03-28  点击次数: 302次

一、多功能净化柱+KRC光化学柱后衍生法

1 简介

多功能净化柱是由多种固相复合填料不仅包括大分子物质,更重要的是含有多种活性亲脂性(非极性)和带电(极性)物质,用来吸附各种酯类,叶黄素,化学物质,碳水化合物和蛋白质等干扰物。多功能净化柱+KRC衍生法就是利用PRIBOLAB公司的Pribofast 226/260多功能净化柱可以将AFT B1、B2、G1、G2很好的分离出来,然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系统可以有效的测定AFT B1、B2、G1、G2含量。

2 多功能净化柱特点:

2.1 多功能净化柱可以简化样品提取、净化步骤,无需清洗和洗提。

2.2 可以实现多种毒素检测,有效降低检测成本;

2.3 HPLC+FLD+KRC衍生化,可以有效提高检测灵敏度,实现较低的检测限(AFT B1 0.05ppb);
2.4 光化学衍生操作简便,无需使用衍生试剂(通常电化学柱后衍生均需要使用衍生试剂,分析成本高,操作麻烦,仪器故障率较高);
2.5 一步法净化,回收率高达90%左右。

2.6 广泛适用于各类农产品:谷物、淀粉、动物饲料、食品、坚果、棉籽等。

3 多功能净化柱/KRC衍生法操作步骤简介:

3.1 提取样品:研磨粉碎、称重25g样品;用乙腈/水(84/16 V/V)混合样品,

高速均质 1 分钟。
3.2 过滤:将提取的样品定量滤纸过滤,收集滤液;

3.3 取4-6ml滤液快速通过 多功能净化柱PribofastM226 或Pribofast M260

3.4 收集过柱溶液,直接用于HPLC检测,KRC衍生化后直接记录AFT浓度。

 

二、免疫亲和柱+KRC光化学柱后衍生法

1 简介

Pribofast AFT总量免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的毒素,从而对毒素样品起到非常针对性的纯化作用,然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系统可以有效的测定AFT B1、B2、G1、G2浓度,提高检测的准确性和灵敏度。

2 免疫亲和柱/KRC衍生法特点:

2.1 特异性很强使得样品净化效果;

2.2 使用免疫亲和柱操作架可以使样品净化快速,提高检测效率高
2.3 HPLC+FLD+KRC柱后衍生化,有效提高检测灵敏度,实现较低的检测限 (AFT B1 0.05ppb)。
2.4 衍生化操作方便,光化学衍生化无需使用衍生试剂(通常电化学柱后衍生均需要使用衍生试剂,分析成本高,操作麻烦,仪器故障率较高)。

2.5 回收率高,达到90%以上

3 免疫亲和柱法操作步骤简介:

3.1 提取样品:研磨、称重50g样品;用甲醇/水(80/20 V/V)混合物将样品

高速混匀 1 分钟。
3.2 过滤:将提取的样品滤膜过 玻璃纤维滤纸,
3.3 将回温的免疫亲和柱安装在泵流操作架进行过柱净化:经过Pribofast AFT总量免疫亲和柱(IAC-010-3)活化、淋洗、洗脱三步骤,洗脱下来的溶液可直接用于HPLC检测;

3.4 测定:HPLC直接进样,经色谱柱、KRC光化学柱后衍生化后直接记录AFT浓度;

三、酶联免疫法检测AFT总量

1 采取直接竞争ELISA方法,利用酶标仪测定样品和标准品的样本的吸光值计算得到样品中AFT总量的含量。

2 试剂盒检测时间:15分钟+15分钟

3 检测限:0.1ppb

4 交叉反应率:

Aflatoxin B1100%
Aflatoxin B280%
Aflatoxin G1101%
Aflatoxin G2100%
AflatoxinM125%

 

关于Pribofast KRC 柱后衍生器和 HPLC参数

●Pribofast KRC 柱后光化学衍生器 波长:254 nm
●HPLC-色谱柱: AFT色谱柱150 x 4.6 mm; C-18
●流动相: 甲醇/水  (45/ 55  v / v)
●流量:1.0 mL/min   柱温: 30 °C
●进样体积:20μL
●荧光检测器:λ-激发波长:365 nm    λ-发射波长:440 nm

●液相色谱仪需要配制:PriboLab公司Pribofast  KRC 柱后光化学衍生器,含有1ml反应池,纳米灯管254nm

 

关于AFT色谱柱:

产品货号产品名称及规格数量
IAC-010-3

Pribofast, Aflatoxins B1, B2, G1, G2  25 columns/pck 3mL, widebore column

AFT总量免疫亲和柱3ml,25支/盒

1盒
M226

PriboFast®226  Multifunctional cleanup column for Aflatoxin and zearalenone

霉菌毒素多功能净化柱,用于AFT、玉米赤霉烯酮检测25支/盒

1盒
PriboFast® 260

PriboFast® 260 Multifunctional cleanup column for Aflatoxin and zearalenone

霉菌毒素多功能净化柱,用于AFT、玉米赤霉烯酮检测25支/盒

1盒
PR K010-96

Pribofast ELISA Kit (96-well plate/stripes)  for detection of Aflatoxin B1, B2, G1, G2 in food and feed samples

AFT 总量ELISA试剂盒包,96孔

1盒
STD#1081

Standard, Solution of 4 different aflatoxins in acetonitrile B1, G1

AFT B1B2G1G2 混合标样。1ml装,4度阴暗保存

也可提供AFT B1B2G1G2 四种单独的固体装标准品。

1盒
KRC-25

Photochemical Reactor for Enhanced Detection Aflatoxin B1, B2, G1, G2; Pribofast KRC-25  230V 50 HzUVE 254 nm lamp

Pribofast KRC 光化学柱后衍生反应系统,254nm纳米紫外灯

1套
ODS-150HPLC-Column for Aflatoxin Analysis, C18 150 x 4.6 mm  AFT液相色谱柱1根
 

泵流操作架/免疫亲和柱操作架,用于免疫亲和柱样品净化操作

(含气泵 转换头等配件,多用连接头是选配)

1套

 

 

关于PriboLab & 北京泰乐祺科技有限公司  

作为面向提供霉菌毒素检测技术解决方案的主要服务商之一,PriboLab凭借强大的研发团队和霉菌毒素检测技术的研究,为农业生产、食品加工与粮食、饲料工业等行业提供专业的真菌毒素检测技术产品与技术服务。北京泰乐祺科技作为 PriboLab在中国的合作伙伴,积极为国内客户提供的霉菌毒素检测技术与产品服务,为国内客户提供适宜的霉菌毒素检测方案,帮助客户建立的霉菌毒素项目检测分析平台。

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