黄曲霉毒素测定----柱后碘衍生法

Aflatoxin是一种具有强致癌性的真菌毒素，广泛存在于粮食、油料、中药材等产品，对食品安全和消费者健康构成潜在风险。我国已明确其要求并制定了相应的检测标准。然而，常规的荧光检测方法易受基质干扰和荧光猝灭效应的影响，难以实现对低含量样品的准确定量。

Pribolab MDS 3000S 柱后衍生系统与高效液相色谱联用，可在线实现碘衍生，提高AflatoxinB₁、G₁的荧光强度，提升检测灵敏度与结果稳定性，符合GB 5009.240国家标准检测要求。本方案基于该系统建立稳定可靠的检测方法，为原料验收、过程控制及成品放行提供技术支持。

1. 检测原理

AflatoxinB₁、G₁自身荧光弱且易猝灭，无法直接实现高灵敏检测。通过Pribolab MDS 3000S 柱后衍生系统，在色谱柱后在线引入碘溶液，与 B₁、G₁分子中的双键发生加成反应，生成荧光强度高、性质稳定的碘代衍生物。该反应在加热条件下效率更高，可显著提升荧光信号，消除基质与流动相的猝灭干扰，最终实现对Aflatoxin B₁、G₁的高灵敏度、高选择性荧光检测。

2. 仪器方法

2.1 液相方法

色谱柱：Pribolab®Aflatoxin衍生专用色谱柱（货号:EH04080）

流动相：A 相，水；B相，乙腈-甲醇（50+50）

柱温：40℃

激发波长：360nm 发射波长：440nm

进样量：50μL

流速：1mL/min

2.2 衍生方法

衍生试剂：Pribolab®Aflatoxin衍生试剂包（货号:YS-AF-005）

衍生温度：70℃

流    速：0.2mL/min

3. 检测结果

3.1  线性

分别精密吸取以下浓度对照品溶液，注入液相色谱仪：

AFB1：0.5ng/mL、2 ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、40ng/mL

AFB2：0.15ng/mL、0.6 ng/mL、1.5ng/mL、3ng/mL、6ng/mL、12ng/mL

AFG1：0.5ng/mL、2 ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、40ng/mL

AFG2：0.15ng/mL、0.6 ng/mL、1.5ng/mL、3ng/mL、6ng/mL、12ng/mL

以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，结果表明曲线线性关系良好，线性相关系数均大于0.999。

3.2重复性

取浓度为AFB1：AFB2：AFG1：AFG2（5：1.5：5：1.5）ng/mL 的Aflatoxin标准品溶液，连续进样 6 针，记录各针峰面积与保留时间。结果显示，6 针检测的峰面积相对标准偏差（RSD）：AFB1为3.82%、AFB2为0.92%、AFG1为0.46%、AFG2为1.21%，符合检测方法学要求。