方案背景

伏马毒素是由镰刀菌产生的高毒性真菌毒素,易污染玉米、饲料及其相关制品,具有潜在致癌性和脏器损伤风险,是食品安全与质量控制的重要检测指标。由于伏马毒素本身无强荧光及紫外吸收,直接检测灵敏度较低,难以满足痕量定量分析需求。
本方案依据国家标准GB 5009.240—2023,采用柱后衍生-高效液相色谱-荧光检测法。该方法通过免疫亲和柱对样品进行前处理净化,再结合邻苯二甲醛在线衍生技术生成强荧光衍生物,大幅提高检测的灵敏度与特异性。方案适用于食品、饲料等多种基质的批量检测,可为食品安全风险监测、质量管控及合规放行提供精准、可靠的技术支撑。
高效液相色谱—柱后衍生

1. 检测原理
伏马毒素(FB₁/FB₂/FB₃)分子自带氨基,在色谱柱分离后,通过Pribolab®MDS 3000柱后衍生仪与邻苯二甲醛(OPA)+ 巯基试剂在线反应,生成强荧光异吲哚衍生物,后经检测器进行定量分析。
2. 仪器方法
2.1 液相方法
色谱柱:Pribolab®伏马毒素衍生专用色谱柱(货号:EH04077)
流动相:甲酸-水溶液(0.1%)
柱温:40℃
检测波长:激发波长:335nm;发射波长:440nm。
进样量:50μL
流速:0.8 mL/min
2.2 衍生方法
衍生试剂:Pribolab®伏马毒素衍生试剂包(货号:YS-FB-003)
衍生温度:40℃
流 速:0.4mL/min

3. 检测结果
分别精密吸取0.01μg/mL、0.02μg/mL、0.05μg/mL、0.1μg/mL、0.2μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL浓度的对照品溶液,注入液相色谱仪,测定峰面积,以峰面积为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
结果如下图所示:


3.2 重复性
取浓度为 1 μg/mL 的FB1/FB2/FB3标准品溶液,连续进样 6 针,记录各针峰面积与保留时间。结果显示,6 针检测的FB1峰面积相对标准偏差(RSD)为0.20%,FB2峰面积相对标准偏差(RSD)为0.17%,FB3峰面积相对标准偏差(RSD)为0.33%,符合检测方法学要求。

方案配置


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